孕烷X受体应答元件萤光素酶报告基因的构建及活性检测

目的建立孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)应答元件萤光素酶报告基因,并检测其活性。方法利用化学合成方法得到五聚体PXR应答元件(everted repeat elelment-6,ER-6元件)5和(direct repeat element-3,DR-3)5序列;将五聚体PXR应答元件序列(ER6或DR3)克隆至p GL3-Promoter载体上;利用萤光素酶报告基因系统检测PXR应答元件报告基因的活性。结果 PXR应答元件萤光素酶报告基因具有明确的活性。PXR激动剂茴香霉素能够剂量依赖地诱导ER6-Luc(R2=0.95;P=0.002 2)和DR3-Luc(R2=0.96;P=0.000 91)报告基因的活性,其EC50值分别为(0.11±0.04)μmol/L和(0.13±0.06)μmol/L;PXR拮抗剂酮康唑能够剂量依赖地降低茴香霉素诱导的ER6-Luc(R2=0.97;P=0.000 85)和DR3-Luc(R2=0.98;P=0.000 11)的活性,IC50值分别为(0.71±0.11)μmol/L和(1.73±0.15)μmol/L。结论成功构建了PXR应答元件报告基因,建立了PXR转录活性的检测方法。     

单硝酸异山梨酯片体内生物等效性研究

目的评价单硝酸异山梨酯片在健康人体相对生物利用度及生物等效性。方法受试者随机、自身双交叉、单剂量口服受试制剂和参比制剂20mg，采用LC／MS法测定血浆中药物浓度，药动学参数采用DAS软件处理获得。结果两种制剂Cmax分别为（486．19±108．22）、（465．62±87．188）ng·ml^-1，Tmax分别为（0．62±0．33）、（0．79±0．49）h，t1／2分别为（4．51±0．60）、（4．60±0．75）h，AUC0-tn分别为（3195．75±421．77）、（3222．92±386.83）ng·h·ml^-1，AUC0-∞。分别为（3350．90±452．63）、（3390．83±401．04）ng·h·ml^-1；相对于参比制剂，受试制剂的生物利用度F0-tn为（99．96±13．25）％。受试制剂和参比制剂的Cmax、AUC0-tn和AUC0-∞经对数转换后进行方差分析，两制剂间无显著性差异（P〉0．05）。结论两种单硝酸异山梨酯片均具有生物等效性。     

灵五颗粒对四氯化碳诱导大鼠慢性肝损伤的影响

目的 研究灵五颗粒对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)致大鼠慢性肝损伤的防治作用,并探讨其可能的作用机制. 方法 将Wistar大鼠随机分为6组,正常组自由饮水,其余5组给予350 mg&#8226;L^-1苯巴比妥水溶液2周诱导肝药酶.实验第3周,用CCl4复制慢性肝损伤动物模型［50% CCl4橄榄油溶液,灌胃,首次剂量0.08 mL,以后按0.08 mL&#8226;(100 g)-¹,每周1次,连续5周］.自造模之日开始,灌胃给药,qd,连续5周.末次给药后禁食16 h,取大鼠血、肝脏、脾、胸腺,检测血清肝功能［丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT), 天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST), 碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、清蛋白(albumin,ALB)、总蛋白(total protein,TP)］指标、肝组织中羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,另取肝脏做病理组织学检查,计算脏器指数. 结果 模型组大鼠有明显肝损伤表现,各给药组肝损伤均有不同程度的改善(P<0.01或P<0.05).病理组织学检查 结果 表明,肝脏病变程度均较模型组明显减轻. 结论 灵五颗粒对CCl4所致慢性肝损伤具有较好的防治作用,保肝降酶效果明显,其机制可能与抑制Hyp增多,降低MDA和升高SOD的抗氧化作用有关.     

葛枳护肝胶囊提取工艺研究

葛枳护肝胶囊是由葛花、豆蔻等组方的中成药,具有解酒、醒酒、护肝、养胃等功效.其主要药效成分为葛根总黄酮.葛根总黄酮的提取方法很多,如乙醇回流提取法、醇渗漉法、超声提取法等[1].     

灵五颗粒保肝退黄降酶作用研究

目的观察灵五颗粒对α 萘异硫氰酸酯（α naphthylisothiocyanate,ANIT）致黄疸型肝损伤模型小鼠的保护作用及作用机制。方法小鼠随机分为正常组,模型组,灵五颗粒低、中、高剂量组（2.5,5.0,10 g&#8226;kg 1）和阳性对照组（茵栀黄颗粒 2.34 g&#8226;kg 1）。正常组和模型组给予0.9%氯化钠溶液,其余各组连续灌胃给药7 d。除正常组外,其他各组末次给药1 h后灌服ANIT,105 mg&#8226;kg-1,制备小鼠肝损伤黄疸模型。48 h后取血、肝脏,分别测定血清丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、总胆红素（total bilirubin,T BiL）,肝脏组织中丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）等,并检查肝脏病理学。结果与正常组比较,模型组小鼠血清T BiL、ALT、AST含量明显升高。灵五颗粒中、高剂量组小鼠血清T BiL、ALT、AST含量均降低,并呈剂量依赖关系;与模型组相比,差异有统计学意义（P＜0.01）。LW中、高剂量组也能显著降低受损肝组织中MDA含量,同时升高SOD、GSH活性。结论灵五颗粒对ANIT所致小鼠黄疸型肝损伤具有保护作用,退黄降酶效果明显,其作用机制可能与抗氧化作用有关。     

大黄水提物不同条件干燥产物理化性质差异的初步研究

目的考察大黄水提液不同条件下干燥产品的理化差异性。方法采用傅里叶变换红外光谱法(FTIR),对不同样品进行分析;并在红外分析结果基础上,利用HPLC法对样品中的5种蒽醌成分进行含量测定,分析FTIR结果与样品化学成分差异的相关性。结果冷冻干燥样品与其他两种干燥工艺样品红外图谱和蒽醌含量差别明显。而喷雾干燥和微波干燥不同条件干燥样品FTIR图谱总体差异不明显,但通过聚类分析将其样品分为3大类。含测结果亦表明第3类中6号(喷雾干燥:进/出风温205~215℃/105~110℃)和10号(微波干燥:10Kw)样品5种蒽醌类成分含量较其他样品差异较大。结论大黄水提液的喷雾和微波干燥工艺样品同冷冻干燥样品有显著差异在一定条件下工艺稳定,适合制剂工业生产。但喷雾干燥工艺进/出风温不宜超过205~215℃/105~110℃,而微波干燥功率应低于10Kw。     

两种制备方法的桃花止泻冲剂的生物热动力学比较研究

目的:对两种制备方法的桃花止泻冲剂进行生物热动力学比较研究,以评价其生物活性差异.方法:制备桃花止泻冲剂的粗粉制剂和微粉制剂,采用微量热法测定大肠杆菌在桃花止泻冲剂粗粉制剂和微粉制剂的水溶液作用下的生物热谱曲线,获得相应的生物热动力学参数,评价桃花止泻冲剂粗粉制剂和微粉制剂的生物活性差异.结果:随着桃花止泻冲剂的粗粉制剂和微粉制剂水溶液浓度的增大,大肠杆菌生长代谢的生长速率常数和最大产热功率值均减小,最高峰的出峰时间和生长抑制率均增大,表明细菌的生长受到抑制,且抑菌作用随着药物浓度的增大而增强.粗粉制剂的半抑制浓度值为35.9 mg/ml,而微粉制剂的半抑制浓度值为31.4 mg/ml.综合分析二者水溶液作用下大肠杆菌的生长代谢曲线和生物热动力学参数可知,桃花止泻冲剂微粉制剂的抑菌作用强于粗粉制剂.结论:微量热法可用于分析桃花止泻冲剂粗粉制剂和微粉制剂的生物活性差异,超微粉碎能增强桃花止泻冲剂的抑菌作用.     

正交试验法优选F胶囊中人参总皂苷的提取工艺

 目的 优选F胶囊中人参总皂苷的提取工艺.方法 采用正交设计对人参总皂苷提取工艺进行优化,利用大孔吸附树脂分离方法,以比色法测定不同工艺提取物中人参总皂苷的含量.结果 人参总皂苷的最佳提取工艺为:60%乙醇,8倍量,提取3次,2 h/次.结论 此法简单、易行、方法重现性好,适用于工业化生产.     

冬虫夏草道地药材与人工虫草菌丝体的分析比较

采用薄层色谱和高效液相色谱法对冬虫夏草与人工虫草菌丝体进行了分析比较，为合理用药提供了依据。     

咽炎颗粒的喷雾干燥工艺研究

目的确定咽炎颗粒喷雾干燥的最佳工艺。方法采用正交试验法，以含水量和蒙花苷含量为指标，考察进／出口风温、辅料加入量、浸膏相对密度3个因素对其的影响。结果咽炎颗粒喷雾干燥的最佳工艺条件为：进／出风温度160—165℃／80—85℃，辅料加入量40％，浸膏相对密度1．14。结论本试验为咽炎颗粒干燥工艺的改进提供了依据。